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河豚毒素的檢測方法,你知道嗎?

2022-05-19 11:48瀏覽量:950

? ? ? ?河豚毒素為自然界最強(qiáng)毒素之一,220攝氏度以上才能分解。毒性相當(dāng)于砒霜的1250倍,只需要0.48毫克就能致人死命。其毒素主要有河豚毒和河豚酸兩種,屬于神經(jīng)毒素的一種,嘔吐、神經(jīng)麻痹、四肢發(fā)冷,進(jìn)而心跳和呼吸停止。


? ? ? ?我國《水產(chǎn)品衛(wèi)生管理辦法》明確規(guī)定:河豚魚有劇毒,不得流入市場,這使河豚毒素檢測越來越為人們所重視。接下來小編帶你了解河豚毒素常見的5種檢測方法:


1.小鼠生物法

? ? ? ?是最原始、最直觀的檢測方法,通過小鼠死亡前所呈現(xiàn)出的典型的河豚毒素中毒癥狀,可迅速地將河豚毒素與其它致死性物質(zhì)區(qū)分開。其原理是,根據(jù)小鼠注射試樣提取液后的死亡時間,查出鼠單位,并按照小鼠體重校正單位,計算確定河豚毒素含量。此方法測得的毒力用小鼠單位來表示。

? ? ? ?優(yōu)點:小鼠法不需要特殊裝置,操作簡便,適用于基層檢驗。

? ? ? ?缺點:計算方式復(fù)雜,重復(fù)性差、費時費力,個體差異大、重現(xiàn)性不好,而且需有一定規(guī)模才能客觀反映實驗結(jié)果。

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2.液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

? ? ? ?試樣經(jīng)提取后利用免疫親和柱凈化,利用液相色譜將混合物進(jìn)行分離,對分離的組分進(jìn)行質(zhì)譜檢測,能同時進(jìn)行定性定量分析。外標(biāo)法定量,本方法的檢測限為1μg/kg,定量限為3μg/kg。

? ? ? ?優(yōu)點:靈敏性高,對樣品的適用性廣,不需要衍生化,大大簡化了分析工作量。能準(zhǔn)確的定量分析河豚毒素,分析結(jié)果具權(quán)威性。

? ? ? ?缺點:分析時間長、分析過程復(fù)雜、檢測費用高、專用儀器昂貴、對樣品的純度要求較高。


3.液相色譜-熒光檢測法

? ? ? ?試樣經(jīng)提取后利用免疫親和柱凈化,液相色譜——柱后衍生熒光法測定,以保留時間定性,外標(biāo)法定量。本方法的檢測限為50μg/kg,定量限為150μg/kg。

? ? ? ?優(yōu)點:較其他方法靈敏度高,較液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法靈敏度低,對樣品的適用性廣。

? ? ? ?缺點:TTX沒有熒光吸收,先要衍生化成具有熒光吸收的物質(zhì),需衍生裝置,操作比較繁瑣。

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4.酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)

? ? ? ?試樣中的河豚毒素經(jīng)提取、脫脂后與一定量的固相抗原競爭結(jié)合一定量的抗體,加入酶標(biāo)二抗反應(yīng),最后加入顯色液,顯色深淺與試樣中待測河豚毒素含量呈負(fù)相關(guān),試樣中河豚毒素含量越高,顯色越淺。

? ? ? ?優(yōu)點:酶聯(lián)免疫吸附法快速、靈敏,不需要復(fù)雜和昂貴的儀器,可以實現(xiàn)大量樣本的初篩工作,滿足現(xiàn)場工作的需要。

? ? ? ?缺點:嚴(yán)格來講,此方法為半定量檢測。

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5.膠體金法

? ? ? ?試樣經(jīng)提取液提取,離心后取上清待測。其原理為待測液中的抗原與NC膜上的預(yù)劃的抗原競爭結(jié)合一定量的抗體,導(dǎo)致CT線呈現(xiàn)出不同的顯色水平。將待測液滴加至檢測卡的加樣孔中,一定時間后根據(jù)CT線的顯色情況進(jìn)行檢測結(jié)果的判讀。

? ? ? ?優(yōu)點:檢測方便,耗時短,效率高,單個樣本檢測僅需10-15min,可以滿足大量樣本的初篩工作。

? ? ? ?缺點:檢測結(jié)果為定性判讀,無法得到具體含量數(shù)值。

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? ? ? ?除上面常規(guī)的檢測方法外,國內(nèi)報道的還有分光光度計法、薄層層析法、高效毛細(xì)管區(qū)帶電泳法等方法。這些方法準(zhǔn)確度不高,操作相對復(fù)雜。國外也有柱轉(zhuǎn)換液相色譜/質(zhì)譜/電噴霧法、薄層層析/快原子轟擊質(zhì)譜法、親水作用色譜-電噴霧質(zhì)譜法、電噴霧離子化質(zhì)譜法等方法的報道,這些方法所需儀器設(shè)備都昂貴,也不便于普遍推廣。

? ? ? ?目前河豚毒素檢測方法多種多樣,各有優(yōu)缺點,大家應(yīng)根據(jù)需要選擇合適的檢測方法。


? ? ? ?說到這里,美正檢測用實力說話!我們具有進(jìn)行河豚毒素檢測能力的資質(zhì),通過了CNAS實驗室認(rèn)可及CMA資質(zhì)認(rèn)定。

? ? ? ?美正在河豚毒素檢測中不僅可為廣大客戶提供第三方檢測服務(wù)還可以提供高品質(zhì)的河豚毒素的標(biāo)準(zhǔn)品和陽性質(zhì)控樣品以及前處理所需的河豚毒素免疫親和柱等相關(guān)耗材。在快速檢測方面美正也可提供河豚毒素ELISA檢測試劑盒,為河豚生鮮的快速入市提供安全保障。


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