本試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在酶標(biāo)板微孔上預(yù)包被氟蟲腈抗原,樣本殘留的氟蟲腈和此抗原競爭氟蟲腈抗體(抗試劑),同時此抗體與酶標(biāo)二抗(酶標(biāo)物)結(jié)合后,經(jīng)TMB底物顯色,樣本吸光度值與其殘留物氟蟲腈呈負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可得出樣本中氟蟲腈的含量。?
適用范圍?
可定性、定量檢測生鮮奶樣本中氟蟲腈的含量。
1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20~25°C)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。?
2、取出需要數(shù)量的微孔板,將不用的微孔板放進(jìn)原錫箔袋中并且與提供的干燥劑一起重新密封,保存于2~8°C。切勿冷凍。
3、洗滌液在使用前也需回溫。?
4、編號:將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號,每個樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。?
5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本:加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50μL到對應(yīng)的微孔中,加氟蟲腈酶標(biāo)物50μL/孔,再加入氟蟲腈抗試劑50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境中反應(yīng)30min。?
6、洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌液250μL/孔,充分洗滌4~5次,每次間隔10s,在吸水紙上拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。
7、顯色:加入底物液A液50μL/孔,再加入底物液B液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境中反應(yīng)15min。?
8、測定:加入終止液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處(建議用雙波長450/630nm檢測,請在5min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測定每孔OD值(若無酶標(biāo)儀,則不加終止液用目測法可進(jìn)行判定)。
結(jié)果判定
請利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計算,更便于大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析(歡迎來電索取)。