本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,在酶標(biāo)板微孔上預(yù)包被多拉菌素抗原,樣本中殘留的多拉菌素和此抗原競(jìng)爭(zhēng)多拉菌素的抗體(抗試劑),加入酶標(biāo)二抗(酶標(biāo)物)后,經(jīng)TMB底物顯色,樣本吸光值與其所含多拉菌素的含量呈負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可得出樣本中多拉菌素的含量。
適用范圍
可定性、定量檢測(cè)生鮮乳樣本中多拉菌素的含量。
1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20~25°C)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2、取出需要數(shù)量的微孔板,將不用的微孔板放進(jìn)原錫箔袋中并且與提供的干燥劑一起重新密封,保存于2~8°C。切勿冷凍。
3、洗滌液在使用前也需回溫。
4、編號(hào):將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本:加入標(biāo)準(zhǔn)品/樣本100μL到對(duì)應(yīng)的微孔中,然后加多拉菌素抗試劑50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境中反應(yīng)30min6、洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌液250μL/孔,充分洗滌4~5次,每次間隔10s,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。
7、加酶標(biāo)物:加入多拉菌素酶標(biāo)物100μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境中反應(yīng)30min,取出重復(fù)步驟6。
8、顯色:加入底物液A液50μL/孔,再加底物液B液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境中反應(yīng)15min(見注意事項(xiàng)8)。
9、測(cè)定:加入終止液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處(建議用雙波長(zhǎng)450/630nm檢測(cè),請(qǐng)?jiān)?min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測(cè)定每孔OD值(若無酶標(biāo)儀,則不加終止液用目測(cè)法可進(jìn)行判定)。
結(jié)果判定
若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算,更便于大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析(歡迎來電索取)