本試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)而成的檢測(cè)產(chǎn)品，與儀器分析技術(shù)相比，具有快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確和靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，操作時(shí)間為45min，能減少操作誤差和工作強(qiáng)度。
試驗(yàn)原理
本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法，在酶標(biāo)板微孔條上預(yù)包被四環(huán)素類藥物抗原，樣本殘留的四環(huán)素類藥物和微孔條上預(yù)包被的抗原競(jìng)爭(zhēng)抗四環(huán)素類藥物抗體（抗試劑），加入酶標(biāo)二抗（酶標(biāo)物），經(jīng)TMB底物顯色，樣本吸光度值與其殘留物四環(huán)素類藥物呈負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)，即可得出樣品中四環(huán)素類藥物的含量。
適用范圍
可定性、定量檢測(cè)蜂蜜、牛奶中四環(huán)素、土霉素、金霉素、強(qiáng)力霉素等四環(huán)素類藥物的含量。
1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫（20~25°C）平衡30min以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。若試劑中有晶體析出，回溫溶解后方可使用。
2、取出需要數(shù)量的微孔板，將不用的微孔放入錫箔袋，保存于2~8°C。切勿冷凍。
3、洗滌工作液在使用前也需回溫。
4、編號(hào)：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本：加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本100μL到對(duì)應(yīng)的微孔中，再加入四環(huán)素類酶標(biāo)物50μL/孔，再加入四環(huán)素類抗試劑50μL/孔輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境中反應(yīng)30min。
6、洗板：小心揭開(kāi)蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用洗滌液250μL/孔，充分洗滌4~5次，每次間隔10s，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳破）。
7、顯色：加入底物液A液50μL/孔，再加底物液B液50μL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境反應(yīng)15min。
8、測(cè)定：加入終止液50μL/孔，輕輕振蕩混勻，設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處（建議用雙波長(zhǎng)450/630nm檢測(cè)，請(qǐng)?jiān)?min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)），測(cè)定每孔OD值。
結(jié)果判定
請(qǐng)利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算，更便于大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析（歡迎來(lái)電索取）。
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