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概要?

脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DeoxynivaLenoL）又稱嘔吐毒素 （Vomitoxin）屬于霉菌的單端孢菌素族，由某些鐮刀霉真菌屬產(chǎn)生。嘔吐毒素多分布于小麥、大麥、玉米等谷物籽實樣本中，由于其具有強的細胞毒性及免疫抑制性質(zhì)，對人類及動物的健康構(gòu)成威脅。?

本試劑盒是應(yīng)用ELISA最新技術(shù)研發(fā)而成的毒素檢測產(chǎn)品，與儀器分析技術(shù)相比具有快速、簡便、準確和靈敏度高等優(yōu)點，操作時間需20min，能減少工作強度和操作誤差。?

實驗原理?

本試劑盒采用間接競爭ELISA 方法，在酶標板微孔上預(yù)包被嘔吐毒素抗原，樣本中的嘔吐毒素和微孔上預(yù)包被的抗 原競爭嘔吐毒素抗體（抗試劑），同時嘔吐毒素抗體與酶標二抗（酶標物）相結(jié)合，經(jīng)TMB 底物顯色，樣本吸光度值與其所含嘔吐毒素含量呈負相關(guān)，與標準曲線比較再乘以其對應(yīng)的校準系數(shù)，即可得出樣本中嘔吐毒素的含量。?

貯藏條件及有效期?

貯藏條件：保存試劑盒于 2~8℃。?

有效期：該產(chǎn)品有效期為 12 個月。

1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫（20~25℃）平 衡 1h 以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。?

2、取出需要數(shù)量的微孔板，將不用的微孔板放進原錫箔袋中 并且與提供的干燥劑一起重新密封，保存于 2～8℃。切 勿冷凍。?

3、洗滌液在使用前也需回溫。?

4、請注意反應(yīng)溫度不宜過高，控制溫度在 20~25℃。?

5、編號：將樣本和標準品對應(yīng)微孔按序編號，每個樣本和標 準品做 2 孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置（建 議在一次實驗過程中，若使用 8 道移液器則標準品和樣本 的總量不宜超過 48 個，即不宜超過 6 個檢測條；建議若 使用單道移液器則不宜超過 16 個，即不宜超過 2 個檢測 條）。?

6、加標準品/樣本：加入標準品或樣本 50μL 到對應(yīng)的微孔中， 加酶標物 50μL /孔，再加入抗試劑 50μL /孔（加抗試劑時 請使用多道移液器），輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置 25℃避光環(huán)境中反應(yīng) 15min。?

7、洗板：小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用洗滌液 250μL /孔，充分洗滌 4~5 次，每次間隔 10s，在吸水紙上拍干（拍 干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破）。?

8、顯色：加入底物液 100μL /孔（加底物液時請使用多道移 液器），用蓋板膜蓋板后置 25℃避光環(huán)境反應(yīng) 5min。?

9、測定：加入終止液 50μL /孔（加終止液時請使用多道移液 器），輕輕振蕩混勻，設(shè)定酶標儀于 450nm 處（建議用 雙波長 450/630nm 檢測，請在 5min 內(nèi)讀完數(shù)據(jù)），測定 每孔 OD 值。