本試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在酶標板微孔上預包被呋喃唑酮代謝物抗原,樣本中殘留的呋喃唑酮代謝物和此抗原競爭呋喃唑酮代謝物抗體(抗試劑),同時呋喃唑酮代謝物抗體與酶標二抗(酶標物)相結(jié)合,經(jīng)TMB底物顯色,樣本的吸光度值與其殘留物呋喃唑酮代謝物的含量呈負相關,與標準曲線比較再乘以其對應的稀釋倍數(shù),即可得出樣本中呋喃唑酮代謝物的含量。?
適用范圍?
可定性、定量檢測生鮮奶、蜂蜜樣本中的呋喃唑酮代謝物的含量。
1、 將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20~25°C)平衡30min 以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。?
2、 取出需要數(shù)量的微孔板,將不用的微孔板放進原錫箔袋中并且與提供的干燥劑一起重新密封,保存于2~8°C。 切勿冷凍。?
3、 洗滌液在使用前也需回溫。?
4、 編號:將樣本和標準品對應微孔按序編號,每個樣本和標準品做2孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。?
5、 加標準品/樣本:加標準品/樣本50μL到對應的微孔中,再加入呋喃唑酮代謝物酶標物50μL/孔,然后再加入呋喃唑酮代謝物抗試劑50μL/孔輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境中反應30min。
6、 洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌液 250μL/孔,充分洗滌4~5次,每次間隔10s,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。?
7、 顯色:加入底物液A液50μL/孔,再加底物液B液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境中反應 15min。?
8、 測定:加入終止液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,設定酶標儀于 450nm 處(建議用雙波長450/630nm 檢測,請在5min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)), 測定每孔OD值。
結(jié)果判定
請利用試劑盒專業(yè)分析軟件進行計算,更便于大量樣本的準確、快速分析(歡迎來電索取)。