本試劑盒采用間接競爭ELISA方法，在酶標(biāo)板微孔條上預(yù)包被土霉素藥物抗原，樣本殘留的土霉素藥物和微孔條上預(yù)包被的抗原競爭抗土霉素藥物抗體（抗試劑），加入酶標(biāo)二抗（酶標(biāo)物），經(jīng)TMB底物顯色，樣本吸光度值與其殘留物土霉素藥物呈負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)，即可得出樣品中土霉素藥物的含量。
適用范圍
可定性、定量檢測蜂蜜、牛奶中土霉素的含量
1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫（20~25°C）平衡30min以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。若試劑中有晶體析出，回溫溶解后方可使用。
2、取出需要數(shù)量的微孔板，將不用的微孔放入錫箔袋，保存于2~8°C。
3、洗滌工作液在使用前也需回溫。
4、編號(hào)：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號(hào)，每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本：加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本100μL到對應(yīng)的微孔中，再加入土霉素酶標(biāo)物50μL/孔，再加入土霉素抗試劑50μL/孔輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境中反應(yīng)30min。
6、洗板：小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用洗滌工作液250μL/孔，充分洗滌4~5次，每次間隔10s，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破）。
7、顯色：加入底物液A液50μL/孔，再加底物液B液50μL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置25°C避光環(huán)境反應(yīng)15min。
8、測定：加入終止液50μL/孔，輕輕振蕩混勻，設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處（建議用雙波長450/630nm檢測，請?jiān)?min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)），測定每孔OD值(若無酶標(biāo)儀，則不加終止液用目測法可進(jìn)行判定)。
結(jié)果判定
若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算，更便于大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析（歡迎來電索取）。
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