磺胺類(SAs)藥物在水產(chǎn)畜禽養(yǎng)殖中應(yīng)用十分廣泛,主要在動(dòng)物疾病防治方面有顯著的療效,但與此同時(shí),這類藥物顯著的毒副作用也引起了人們的廣泛關(guān)注。例如:影響泌尿系統(tǒng)功能,引起結(jié)晶尿,血尿等反應(yīng)及致癌性。因此國(guó)內(nèi)外對(duì)動(dòng)物性食品中磺胺類藥物以及單一磺胺藥物的殘留限量都做出了相應(yīng)的規(guī)定。
本試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)的藥物殘留檢測(cè)產(chǎn)品,具有快速、簡(jiǎn)便和靈敏度高等優(yōu)點(diǎn),操作時(shí)間需45min,能減少檢測(cè)時(shí)間和操作誤差。
1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20~25℃)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2、取出需要數(shù)量的微孔板,將不用的微孔板放進(jìn)原錫箔袋中并且與提供的干燥劑一起重新密封,保存于2~8℃。切勿冷凍。
3、洗滌液【配液1】在使用前也需回溫。
4、編號(hào):將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本:加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50μL/孔到對(duì)應(yīng)的微孔中,再加入磺胺類多殘留酶標(biāo)物50μL/孔,再加入磺胺類多殘留抗試劑50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置于25℃???避光環(huán)境中反應(yīng)30min。
6、洗板:小心揭開(kāi)蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌液【配液1】250μL/孔,充分洗滌4~5次,每次間隔10s,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳破)。
7、顯色:加入底物液A液50μL/孔,再加底物液B液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置于25℃避光環(huán)境中反應(yīng)15min。
8、測(cè)定:加入終止液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處(建議用雙波長(zhǎng)450/630nm檢測(cè),請(qǐng)?jiān)?min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測(cè)定每孔OD值(若無(wú)酶標(biāo)儀,則不加終
止液用目測(cè)法可進(jìn)行判定)。