喹諾酮類(QNs),又稱為吡酮酸類或吡啶酮酸類,是一類重要的廣譜抗生素藥物,能夠抑制細(xì)菌DNA螺旋酶,常被作為抗感染藥物在水產(chǎn)畜禽養(yǎng)殖中使用。由于其存在耐藥性和潛在致癌性,世界各國對其部分藥物的限量值(MRL)作了明確規(guī)定。
本試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)的新一代藥物殘留檢測產(chǎn)品,與儀器分析技術(shù)相比具有快速、簡便、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn),能減少工作強(qiáng)度。
1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20~25℃)回溫30min以上,注意每種液體試劑使用前均需輕輕搖勻。
2、取出需要數(shù)量的微孔板,將不用的微孔板放進(jìn)原錫箔袋中并且與提供的干燥劑一起重新密封,保存于2~8℃。切勿冷凍。
3、洗滌液(配液1)在使用前也需回溫。
4、編號:將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號,每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本:加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50μL到對應(yīng)的微孔中,然后加入喹諾酮類酶標(biāo)物50μL/孔,最后加入喹諾酮類抗試劑50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置于25℃
避光環(huán)境中反應(yīng)30min。
6、洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌液(配液1)250μL/孔,充分洗滌4~5次,每次間隔10s,用吸水紙拍干(拍干后若有氣泡,可用未使用過的槍頭戳破)。
7、顯色:加入底物液A液50μL/孔,再加底物液B液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置于25℃避光環(huán)境中反應(yīng)15min。
8、測定:加入終止液50μL/孔,輕輕振蕩混勻。設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處(建議用雙波長450/630nm檢測,請?jiān)?min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測定每孔OD值(若無酶標(biāo)儀,則不加終止液用
目測法可進(jìn)行判定)。